alamarBlue®是一种快速、灵敏的细胞增殖和细胞毒性检测试剂,适用于人、动物细胞、细菌和真菌等多种研究对象,可用于贴壁细胞和非贴壁细胞的检测。作为一种无毒、即用型的试剂,alamarBlue®为细胞增殖分析提供了一种简便、快速、安全、经济、可靠的方法。
AlamarBlue® 的特点与优势
● 使用简单方便:即用型的单组分试剂,只需加入培养基即可检测细胞的增殖状况;产生的还原产物是水溶性的,与其他常用的细胞增殖检测方法相比,不需要固定、洗涤、提取的步骤
● 灵活:可通过分光光度计或荧光光度计检测
● 性价比高:可用于高通量分析
● 安全:对细胞无毒、无害,不影响细胞代谢、细胞因子分泌、抗体合成等,对人体和环境也无毒无害
● 高灵敏:最低可检测50个细胞
● 稳定:适用于对细胞增殖状况的连续观察
● 经济:无需裂解细胞,细胞可继续培养或用于其他实验
● 可靠:文献引用率高,Pubmed有上千篇文献的引用
AlamarBlue® 的应用
● 监测细胞的生长增殖状态、研究细胞周期、细胞凋亡
● 监测生长因子活性,评估生长因子对细胞增殖的影响
● 治疗性药物尤其是肿瘤治疗药物的开发
● 环境污染物质的评估,细胞毒分析
● 抗生素效价评估
AlamarBlue® 的原理
细胞增殖过程中,细胞体内的环境由氧化环境变化成还原环境,呼吸链中的NADPH/NADP, FADH/FAD, FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高。alamarBlue®的活性成分resazurin (刃天青)是一种无毒、可透膜的蓝色染料,有微弱的荧光性,它作为一种氧化还原指示剂,被细胞内吞后,在细胞质中被以上这些代谢中间体还原,其还原产物resorufin呈现出粉红色并有很强的荧光性,最后可用普通分光光度计或荧光光度计进行检测,吸光度和荧光强度与活性细胞数成正比,因而可作为细胞增殖和细胞毒性定量检测的一个理想的指示器。
AlamarBlue® 的操作流程以及结果计算
操作非常简单、容易:在培养的细胞中加入alamarBlue® , 于37°C 孵育1-4小时,然后读取荧光值或吸光值(荧光检测为 530-560 nm 激发,发射光波长为590 nm ,或者在 570 nm 和 600 nm用分光光度计测定光吸收值)。
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