细胞转染作为细胞生物学和分子生物学常用的技术手段，在实验过程中，会遇到转染效率低或者细胞毒性大，影响后续实验进行，遇到以上细胞转染实验的问题，可以试试TransIT-X2 转染试剂。TransIT-X2 Dynamic Delivery System适用于多种细胞系，且毒性小，质量稳定，可以降低转染失败的概率，并快速得到正确的实验结果。
产品介绍
TransIT-X2®Dynamic Delivery System是一种先进的非脂质体聚合系统，可以高效转染多种细胞类型，例如A549、AsPC-1、BHK-21、BJ、BT-20、Caco-2、C2C12、CFPAC-1、CHO-K1、DI-TNC1、DU-145、HEPG2、HCC1143、HCC38、HEK293、HMEC(epithelial)、HUVEC、FreeStyleTM293-F、MDCK、NHDF、NIH-3T3、L929、LNCaP、PC-12、RAW 264.7、T47D、AU565、BxPC-3、COS-7、Hela、HCT 116、MCF-7、MDA-MB-231、PC-3等。TransIT-X2可用于DNA，siRNA等转染。TransIT-X2转染不需要培养基改变，可以在含血清的培养基中进行。
产品特性
● 在广泛的细胞类型中具有优良性能
● 适用于多种应用
● 高效传递质粒DNA、siRNA/miRNA和CRISPR/Cas9组分
● TransIT-X2®系统可在多种细胞类型中实现卓越的基因表达
Mirus TransIT-X2®转染试剂常见包装
MIR 6003 | TransIT-X2® Tranfection Reagent | TransIT-X2®转染试剂 | 1 × 0.3ml |
MIR 6004 | TransIT-X2® Tranfection Reagent | TransIT-X2®转染试剂 | 1 × 0.75ml |
MIR 6000 | TransIT-X2® Tranfection Reagent | TransIT-X2®转染试剂 | 1 × 1.5ml |
MIR 6005 | TransIT-X2® Tranfection Reagent | TransIT-X2®转染试剂 | 5 × 1.5 ml |
MIR 6006 | TransIT-X2® Tranfection Reagent | TransIT-X2®转染试剂 | 10 × 1.5 ml |
Mirus TransIT-X2®转染试剂转染试剂数据和文献
(1)使用TransIT-X2®Dynamic Delivery System在多细胞系和原代细胞中高效转染GFP
采用TransIT-X2®Dynamic Delivery System转染EGFP质粒DNA至A549、CHO-K1、Hep G2、MDCK、LNCaP、PC-12、原代人乳腺上皮细胞(HMEC)和正常人真皮成纤维细胞(NHDF)。在96孔板上用0.2-0.4µl的TransIT-X2®转染0.1µg的DNA(试剂与DNA的比例2:1、3:1或4:1)。使用Guava® easyCyte™ 5HT流式细胞仪检测三次转染48小时后的每个孔。
(2)使用TransIT-X2®Dynamic Delivery System可视化高GFP表达
采用TransIT-X2®Dynamic Delivery System将编码EGFP的质粒DNA转染到A549、CHO-K1、HepG2、LNCaP、MDCK、PC12、原代人乳腺上皮细胞(HMEC)和正常人真皮成纤维细胞(NHDF)。转染在35mm MatTek培养皿中进行，使用4-8µl的TransIT-X2®传递2µg的DNA。转染48小时后，使用Zeiss Axiovert S100倒置荧光显微镜捕捉图像(32X)。
(3)TransIT-X2®Dynamic Delivery System优于Lipofectamine®试剂。
A549 (A)或MDCK (B)细胞用荧光素酶编码质粒DNA转染，使用TransIT-X2®(Mirus Bio)，Lipofectamine®2000 (Thermo Fisher Scientific)或Lipofectamine®3000 (Thermo Fisher Scientific)，在指定的试剂-DNA比率或试剂- p3000™- DNA比率下转染24小时。转染通过荧光素酶活性测定。细胞毒性是通过定量从受损细胞的细胞质中释放的LDH来评估的。与Lipofectamine®2000或Lipofectamine®3000的细胞相比，在最佳比例下转染Trans - x2®的细胞中可以观察到更高的转基因表达和更低的细胞毒性。
(4)TransIT-X2®Dynamic Delivery System比Lipofectamine®2000获得更高的击倒率。
TransIT-X2®Dynamic Delivery System和Lipofectamine®2000转染试剂被用于转染靶向内源性蛋白质- GAPDH和AHA1的siRNA，或在正常人类真皮成纤维细胞(NHDF)中传递非靶向siRNA控制。根据每个制造商的协议，用4µl的Trans IT-X2®或6µl的Lipofectamine®2000和25 nM的siRNA转染在6孔板上的细胞。使用qRT-PCR相对于18s rRNA水平测量GAPDH或AHA1 mRNA的量，然后在转染后48小时归一化至非靶向对照组的mRNA水平。误差条表示三次孔的标准差。
转染实验操作流程
转染流程包括培养细胞，制备TransIT-X2®试剂和DNA复合物，将复合物添加到完全生长培养基中的细胞中，具体操作流程和相关问题解决方案可参考说明书。（https://www.mirusbio.com/products/transfection/transit-x2-dynamic-delivery-system#product:MIR%206000）
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