细菌是广泛存在的单细胞微生物。它们的直径通常只有几微米,形状各异,从球状、棒状到螺旋状。细菌是细胞培养中最常见的生物污染物14, 15。尽管可以用光学显微镜进行检测,在污染的早期阶段,细菌很容易被误认为是细胞碎片。
常见的细菌污染“嫌疑者”
在污染的早期,细菌很容易被误认为是细胞碎片。
细菌污染的源头:
1.实验室操作人员葡萄球菌的主要源头。
2.脏水浴、恒温箱、玻璃器皿等 假单胞菌和黄杆菌的主要源头。
3.从动物组织分离出的细胞 共生菌群和/或无症状感染的源头。
细菌污染的检测
在污染的早期阶段,因为细菌(10-100μm)比真核细胞(1-10μm)小得多,它们可能被误认为是细胞碎片。因此,在显微镜下使用相位对比(100x-400x)检查细胞培养非常重要。
您有没有看到小黑点、棒状物、螺旋状物?它们可以是单独存在、成链存在、或者成簇存在?它们是能活动的吗?如果答案是肯定的,您的细胞培养可能受到了污染。
由于细菌生长速度快,它们能在48小时内引起培养基的变化,细菌污染从105 CFU/ml起变得肉眼可见,培养基呈浑浊状态。细菌代谢导致培养基pH值下降,如果含有酚红,培养基会从红色变到黄色表
示pH值下降。最终,培养环境不再适合真核细胞导致其死亡。
这些受污染的培养物应该被丢弃,但如果它们是不可替代的话,可使用InvivoGen的复合抗生素处理。
预防污染试剂
Normocin™
• 广谱:杀灭支原体、细菌和真菌
• 安全:对哺乳动物细胞毒性极低
Normocin™是包含三种抗生素的创新配方,具有抗支原体、细菌(革兰氏阳性和革兰氏阴性)和真菌(包括酵母)的活性。它被广泛使用及引用为细胞培养基中的“常规添加物”来防止污染。Normocin™可与青霉素和链霉素(Pen-Strep)溶液结合使用,以扩大抗菌谱。Normocin™能提供最大限度的保护,并以最低的细胞毒性防止微生物污染。
多重耐药细菌去除剂
Normocure™
• 随时可用:直接添加到培养瓶
• 快速:3次传代内拯救细胞培养
• 安全:对哺乳动物细胞毒性极低
Normocure™是从革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌,特别是抗青霉素和链霉素的非发酵革兰氏阴性细菌中拯救宝贵细胞系的最佳武器。Normocure™是由三种抗生素家族的成分组成的混合物。通
过一次传代就可以清除99%以上的细菌污染物。这些抗生素的靶点不存在于真核细胞,保证了Normocure™的低细胞毒性。
温馨提示:所有InvivoGen的细胞系都配备了Normocin™,它是一种广谱的抗菌剂,帮助您保护细胞的安全。
原代细胞抗微生物剂
Primocin™
• 广谱:杀灭支原体、细菌和真菌
• 安全:对原代细胞无毒
Primocin™含有四种化合物,其中三种阻止了革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌和支原体的DNA和蛋白质合成。第四种化合物通过破坏细胞膜的离子交换来根除真菌,包括酵母。Primocin™已成功用于许多原代细胞,包括鼠源和人源肿瘤源细胞系、胚胎细胞和诱导性多能干细胞。
有关细菌污染产品的常见问题:
问:你们的抗微生物试剂会否干扰筛选抗生素?
答:不会,它们不干扰常见的筛选抗生素,如G418、杀稻瘟素(Blasticidin)、嘌呤霉素(Puromycin)、潮霉素 B (Hygromycin B)或 Zeocin™。
问:我们的培养物有细菌污染,但无法确定是哪种菌株。要确保消除细菌,应该选择哪个产品?
答:我们强烈推荐使用Normocure™,它是一种广谱抗菌剂,对革兰氏阳性或阴性细菌非常有效。Normocure™可以拯救被环境细菌(如葡萄球菌属和无色杆菌属)污染的细胞培养物。
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相关文献:
— Magupalli V. G. et al., 2020. Science. HDAC6 mediates an aggresome-like mechanism for NLRP3 and pyrin inflammasome activation. DOI: 10.1126/science.
aas8995.
— Polyzoz A. A. et al., 2019. Cell Metab. Metabolic Reprogramming in Astrocytes Distinguishes Region-Specific Neuronal Susceptibility in Huntington Mice.
DOI: 10.1016/j.cmet.2019.03.004.
— Ganesh K. et al., 2020. Nat. Cancer. L1CAM defines the regenerative origin of metastasis-initiating cells in colorectal cancer. DOI: 10.1038/s43018-019-0006-x
预防/去除细菌污染的相关产品
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Primocin™ | Reagent for preventing microbial contamination in primary cells
| 500 mg (10 x 1 ml) 1 g (1 x 20 ml)
| ant-pm-1 ant-pm-2 |
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