Cayman cGMP测定法是一种竞争性ELISA,可用于直接从细胞裂解液、组织匀浆、血浆或尿液中定量检测cGMP。检测范围为0.23-30 pmol/ml,灵敏度(80%B/Bo)约为1 pmol/ml。
本实验是基于游离cGMP和AChE结合物(cGMP示踪剂)对有限数量的cGMP特异性兔抗体结合位点的竞争。因为cGMP示踪剂的浓度是恒定的,而cGMP的浓度是变化的,所以能够与兔抗体结合的cGMP示踪剂的数量将与孔中cGMP的浓度成反比。
(上图为乙酰胆碱酯酶催化的反应)
背景
鸟苷3',5'环单磷酸(cGMP)是一种关键的细胞内第二信使分子,在各种激素和药物的反应中负责细胞信号的转导。cGMP是由GTP通过膜结合和可溶性的鸟苷酸环化酶合成的。颗粒型鸟苷酸环化酶包含cGMP催化结构域和细胞表面受体功能。在哺乳动物中,已经确定了六种膜形式(GC-A-F),其中只有三种具有已知的配体。
可溶性鸟苷酸环化酶是由α(α1或α2)和β(β1或β2)亚基组成的异源二聚体。α1/β1异源二聚体被内源性一氧化氮nM浓度激活数百倍,导致细胞内cGMP的积累。cGMP控制的下游介质包括cGMP门控通道、cGMP依赖激酶和cGMP调节的磷酸二酯酶。特定细胞中cGMP的相对丰度可以作为激动剂激活的标志,激动剂通过颗粒型鸟苷酸环化酶作用于细胞表面,或一氧化氮在细胞内激活可溶性鸟苷酸环化酶。
环GMP酶联免疫吸附测定试剂盒产品信息:
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