基于非生物素微聚合物的检测系统、信号强、背景低、灵敏度高。
与传统基于亲和素-生物素复合物检测方法(例如,ABC试剂盒)相比,基于微聚合物的检测是IHC检测中较为先进的实验方法之一。相较于ABC法,微聚合物检测具有显著的优势,例如在同一组织切片上进行多抗原标记(multiplexing),或样本本身内源性生物素水平较高等情况,使用微聚合物法进行检测更易获得理想的染色结果。
该微聚合物检测系统主要由酶复合物和二抗(可与一抗结合)聚合在一起组成。与使用酶标二抗相比,这种聚合物形式可在靶标蛋白染色位点引入更多的酶,使用底物显色时,可产生更强的信号。此外,ABC法需要二抗和亲和素-生物素复合物单独孵育(两次孵育),而微聚合物法仅需一个孵育步骤,大大缩短了IHC的实验流程。
最初引入的微聚合物检测系统是由葡聚糖或其类似物组成。由于其体积较大,在某些组织中存在一些固有问题。Vector Laboratories的ImmPRESS微聚合物系统经过多重优化,由体积较小的微聚合物组成,更容易渗透到样本中,尤其是较厚不易着色的部位,可最大限度的避免空间位阻,与一抗进行特异性结合。
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乳腺癌组织样本: • Estrogen Receptor(m), ImmPRESS Reagent(HRP; Universal), Vector DAB(棕色), • Cytokeratin AE1/AE3(m), VECTASTAIN ABC-AP Kit(Universal), Vector Red(洋红)。 | 乳腺癌组织样本:
• Estrogen Receptor(m), ImmPRESS Reagent(HRP; Universal), Vector NovaRED™ HRP Substrate(红色), • CD34(m), ImmPRESS Reagent(HRP; Universal), Vector DAB+Ni HRP Substrate(灰黑色)。 |
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小肠组织样本:
• Neurofilament 200 kDa(m), ImmPRESS Reagent(HRP) Anti-Mouse IgG, Vector VIP(紫色) , • Desmin(m), ImmPRESS Reagent(HRP) Anti-Mouse IgG, Vector SG(蓝灰色)。 | 乳腺癌组织样本:
• Estrogen Receptor(m), ImmPRESS Reagent(HRP; Universal), Vector NovaRED™(红色), • CD34(m), VECTASTAIN ABC-AP Kit(Universal), Vector Blue(蓝色)。 |
ImmPRESS® One-Step 一步法多聚物检测系统(适用于单抗原检测)
ImmPRESS Polymer检测系统
ImmPRESS聚合物试剂由高活性的过氧化物酶或碱性磷酸酶与经预吸附、亲和纯化的二抗形成的微聚合物组合而成。这种独特的微聚合物偶联技术可使抗体与足够的酶结合,并以最小空间分子形式与靶标结合。由于ImmPRESS聚合物试剂提高了识别靶标蛋白的概率,可获得特异性结合、信噪比高以及低背景的高清晰染色结果,使其成为免疫组织化学和免疫细胞化学染色的又一利器。
灵敏度高,背景低——染色结果清晰、特异性强
即用型一步法检测——无需混合操作,染色方便易行
包含预稀释的封闭血清
检测所需时间短
非生物素检测系统
分辨率高
适用于细胞核和细胞膜抗原染色
适用于多抗原染色
ImmPRESS HRP PLUS Polymer Kits
与non-PLUS ImmPRESS HRP Polymer Kits相比,ImmPRESS HRP PLUS Polymer Kits所含组分试剂更多,包含了完成IHC实验流程的一些其他辅助试剂。ImmPRESS HRP PLUS Polymer Kits无需实验者对实验条件进行过多优化,其包含IHC实验必需的全套试剂,大大简化了检测步骤。
ImmPRESS HRP PLUS Polymer Kits试剂盒组成:
-BLOXALL 内源性酶封闭试剂
-2.5% 正常血清
-ImmPRESS HRP polymer reagent
-ImmPACT DAB EqV底物(色原和稀释液)
ImmPRESS VR Polymer Kits
此外,Vector Laboratories还提供预先经交叉吸附的ImmPRESS VR (Veterinary Reagents) Kits,该试剂盒常用于基础研究的动物模型(如牛、山羊、绵羊、猪、马、猫、狗、兔、大鼠、小鼠)中靶标蛋白的诊断和检测,其内源性组织的交叉反应最小。
ImmPRESS Polymer Kits使用步骤
ImmPRESSOne-StepDoubleStainingPolymer Systems(适用于双抗原染色)
ImmPRESS Duet Double Staining Polymer Systems
ImmPRESS Duet Double Staining Polymer Kits(双抗原染色试剂盒)能够在同一组织切片上对两种不同的靶标抗原进行快速、清晰的定位和观察。利用Vector公司独特的ImmPRESS聚合物技术,将高活性辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AP)酶聚合物与经高度交叉预吸附、亲和纯化的二抗(鼠抗和兔抗)结合。然后将这些试剂以最优稀释度混合,最后形成稳定的预稀释、即用型HRP/AP形式的试剂。该试剂盒可与来源于小鼠和兔的一抗搭配使用,并可节省实验时间、简化实验步骤,一步即可完成双抗原染色,大大提高了实验效率。为了获得高灵敏度和双抗原着色对比明显的染色结果,该试剂盒包含两种不同酶底物,ImmPACT DAB EqV(HRP,棕色)和ImmPACT Vector Red(AP,洋红)底物。
ImmPRESS Duet Double Staining Polymer Kit还适用于非啮齿动物组织样本的双抗原染色。不论是在同一细胞的同一结构中,对两种靶标抗原进行共定位(不会重叠),还是区分不同的细胞区室或不同的细胞类型中表达的抗原,使用该试剂盒均可获得可靠且可重复的结果。
ImmPRESS Duet Double Staining Polymer Kit试剂盒组成:
• BLOXALL 内源性酶封闭试剂
• 2.5% 正常马血清
• ImmPRESS Duet HRP/AP Polymer Reagent ( Anti-Rabbit IgG and Anti-
Mouse IgG混合物)
• ImmPACT DAB EqV 底物 (HRP, 棕色)
• ImmPACT Vector Red 底物 (AP, 品红色)
ImmPRESS One-Step Double Staining Polymer Systems使用步骤
ImmPRESS Two-Step两步法多聚物检测系统(适用于单抗原染色)
ImmPRESS Excel Amplified Polymer Staining Systems
ImmPRESS Excel Amplified Peroxidase(HRP)Polymer染色系统是完整形式的染色试剂盒,可充分利用ImmPRESS HRP Polymer系统技术的所有优势,操作简便快速且具有更高的灵敏度。
该检测系统采用即用型(R.T.U)信号放大抗体,并搭配ImmPRESS Excel HRP Polymer试剂一起使用。这些试剂均经过亲和纯化和多种属交叉吸附处理,确保可以获得更高灵敏度和更低背景的染色结果。与其内带有的ImmPACT DAB EqV底物联合使用,可产生清晰的深棕色反应产物,这也是ImmPRESS/ImmPACT系列产品的
一大特色——超高灵敏度。
如果需要检测的靶标抗原表达较弱,在未知其表达水平的情况下,如基因敲入研究,或确定靶基因表达是否上调时,推荐使用ImmPRESS Excel Amplified HRP Kits。该试剂盒检测结果可靠、一致,试剂无需稀释,大大缩短了实验时间。
ImmPRESS Excel Amplified Polymer Kits (Peroxidase) |
Anti-Rabbit IgG Anti-Mouse IgG |
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Colon:Anti-CD34 (m), ImmPRESS ExcelAmplified Anti-Mouse IgG Staining Kit,ImmPACT DAB EqV (brown), HematoxylinQS counterstain (blue). |
ImmPRESS Excel Amplified Staining Kit试剂盒组成:
• BLOXALL 内源性酶封闭试剂
• 2.5% 正常马血清
• Amplifier Antibody (goat anti-rabbit IgG 或 goat anti-mouse IgG)
• ImmPRESS Excel Polymer检测试剂 (horse anti-goat IgG)
• ImmPACT DAB EqV 底物 (色原和稀释液)
ImmPRESS Two-Step Amplified Polymer Systems使用步骤
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